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中草药化妆品论坛 | 王艳:基于协同增效作用美白祛斑中药化妆品研究

原创美妆头条

2021-11-19 14:32

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摘要 | 抗氧化系统与黑色素生成系统存在此消彼长的关系

2020年10月29日,由天津中医药大学与天津尚美化妆品有限公司联合主办、《美妆头条》新媒体承办、世界中医药学会联合会中药养颜产业分会协办的“首届中草药科技与化妆品应用论坛”,在天津香格里拉大酒店盛大举办。

 

本次会议以“中药悟道·对话国潮”为主题,旨在凝聚中医药行业与化妆品行业的力量,推动中草药化妆品的发展,助力我国化妆品产业筑梦腾飞。

 

 

天津中医药大学硕导、天津尚美科技特派员王艳在会上发表了主题演讲《基于协同增效作用美白祛斑中药化妆品研究》,以下为演讲内容:

 

大家上午好!

   

非常高兴和大家分享一下我们和尚美做的一些基础性的研究,今天汇报的题目是《基于协同增效作用美白祛斑中药化妆品研究》。

   

我们先认识一下紫外线对于人体皮肤的损伤,紫外线实际上是在生活当中无处不在的,太阳光中主要的波长的范围,是指从100纳米到400纳米之间的,根据波长的不同,我们又把它分为UVC短波,UVC中波,UVC长波,不同波长紫外线有一定的特点,然后对皮肤造成一定的损伤。

   

波长范围和穿透能力呈一定正比,紫外线UVC短波波长最短,携带能量比较高,穿透力最差,UVC短波不能穿透大气层,被大气层隔离。UVB段中波长,可以穿透大气层,能够到达地球表面,不能透过玻璃和衣服。UVA是紫外线最多的,所占的比例达到98%以上,这个波长的范围,防晒产品里面,大家经常看到防晒品都是防UVA和UVB,不但可以穿透大气层可以穿透玻璃和衣服。有的人教育你在屋里需要防晒,你防的是UVA。

   

紫外线能量和波长成反比,UVA对于皮肤造成什么样的伤害呢?可以穿到真皮层,会造成我们晒黑。军训,晒黑晒老产生皱纹皮肤松驰。UVB是什么范围呢?穿透能力不是很强,到达角质层,但是它所涵盖能量比较高,所以一般造成皮肤炎症,比如说户外运动的时候,把衣服去掉以后,没有衣服保护的地方会出现UVB损伤,说明UVB不会穿透衣服。

   

这张图片看一下紫外线对于皮肤损伤生物学的变化,大家看到这些英文符号实际上都是表皮皮肤生物学机制,包括蛋白和基因的影响,或者是高表达和低表达。可以看出来,当我们皮肤接收到紫外线照射的时候,皮肤发生了什么。

   

标红的地方是黑色素生成,当紫外线照射的UVA皮肤会启动络氨酸酶激活,生成黑色素,会激活MMP1,直接产生的结果,胶原蛋白的降解,以及炎症反应和(脱离脂酸酶)等等,刚才看到皮肤发炎,去海边皮肤会变红,还会皮肤干燥。

   

我要跟大家分享是什么?实际上你长期接受紫外线照射,欧美地区,白种人天天要去做日光浴,这个人种最常发生的病就是光老化。我们给大家看到这张图片是非常著名的,在百度搜光老化一定会在第一屏找到这张图片,这个人是卡车司机,经过长期左右两侧不一样所处的环境,直接决定右侧脸是光老化的脸,左侧是一个自然老化的症状。这实际上是紫外线对他造成的损伤,但是与他不同的是,黑色素生成和另外三个因素不太一样。

   

先了解一下黑色素具有什么样的作用?黑素细胞在哪?黑素细胞是位于表皮层和真皮层之间,肌底层,只有这一层有黑素细胞。为什么说一下它的位置,它的位置决定了给药方式非常独特,很多美白祛斑产品大家说效果不好,加了中药效果也不好,为什么不好?因为位置体积小,肌底皮肤给药的特点,皮肤是屏障作用,外界化妆品和药物不好进入,好不容易进入以后会遵循被动扩散的原理,从高浓度向低浓度扩散,能停留在靶部位的药物非常低,美白祛斑化妆品作用不理想,是有客观因素。能不能提高外用药物的浓度,实际上效果很有限,浓度过高,对于皮肤有刺激性,即使等倍的提高未必在靶部位等倍的提高,这一点和胃肠道吸收有本质的区别。

   

再了解一下黑色素怎么生成的?黑素细胞生成黑色素小体,并向周围的角质形成细胞伸出细长的树状胞突,具有将黑色素小体转运至其他的细胞的能力,在这个过程当中,角质形成细胞形成旁分泌影响因子。

   

刚才一上来先介绍紫外线,实际上紫外线是激活黑素细胞生成黑色素最重要的因素,除此之外负面情绪和压力也会导致黑色素生成。生成以后黑色素向角质层代谢,看起来有色斑,或者经过一个夏天皮肤变黑。

   

下面通过一张病理切片了解一下生成黑色素在皮肤当中是什么样的作用?通过这个病理切片可以看到,黑色素是在细胞核的上层,是在这个位置出现的,它的作用是什么呢?叫光保护帽的作用,因为黑素细胞具有吸收紫外线的作用,因为有紫外线吸收的作用。在黑色素过程当中并不是一个有害的东西,只不过我们是亚洲人黄种人,自古以白为美,我们觉得皮肤变黑了觉得不好,希望把皮肤变白,这是人的主观决定的。

   

这张图看一下黑色素怎么生成,大家可以搜一下跟黑色素生成相关,都会有类似的图,络氨酸在活性样的作用下形成多巴,继续形成多巴醌,形成不同的分支,其中一个会生成真黑素,另外一个生成褐黑素。络氨酸在反应过程当中出现两回,我们叫做新霉素,无论是国际还是国内,对于美白祛斑的产品或者成分,或者功能研究,全部都是集中到了络氨酸酶抑制剂。

   

认识一下黑色素有什么作用?有两个主要作用。

   

一是光保护帽,吸收紫外线。

   

二是清除自由基。对于人体有非常好的作用,帮助我们防止紫外线对于人体的损伤,还有一个问题,大家经常说我要晒晒太阳促进钙吸收,黑色素对于钙吸收来讲是负调节,不是一个好的现象。

   

这张图展示的是人进化过程中是非常聪明的过程,对你产生任何现象也好,或者说疾病现象也好绝对不是凭空产生的,这张图可以看出来,皮肤颜色的分布和紫外线纬度直接相关,在赤道这一带以肤色深一些为主,因为紫外线辐射强度大,需要黑色素进行保护。但是在纬度高一些的地方,紫外线强度没有这么大,这个地区很少见颜色深的,如果颜色再深了,会影响钙的合成了,影响维生素D的合成,影响钙吸收。

   

了解一下黑色素功能和生成以后,后面主要给大家介绍一下和尚美这边基于这边一个思路,提出一个科学问题进行了深入研究。

   

紫外线照射皮肤会产生大量的自由基,这是谁也不能扭转的,这是客观存在的现象。当你产生自由基的时候,紫外线会激活络氨酸酶发生系列反应,最终生成一个真黑素,真黑素可以清楚自由基,这个反应是环状没有问题。人体进化非常科学,不是只有一个黑色素生成系统,我们的皮肤包括身体和任何部位都会有一个抗氧化系统,这些蛋白都具有清除自由基的作用。

   

这个时候想了一下,如果传统采用一个激活抑制络氨酸酶的方式,可能对黑色素清除效果不是很满意,换一种思路看看可不可以。

 

我当时怎么想到这个思路,如果我们现在去打仗,手下有一名将可以调度,一个人擅长厮杀,我可以用他,但是打仗不是一天完事,得备用粮草,可能调用第二个人,这个人善于琐碎的工作,如果是这种情况下会不会产生事半功倍的效果,一定会的。

 

如果只用第一个人,他特别擅长打仗让他完成这件事,行不行?也行,但是一定面临更多人力调配。比如说,给药量一定要增加,但是给药量能无限增加吗?不行的。这就是我们说的,皮肤给药的特点和局限性。我们设想一下,找一个活性特别强的抗氧剂去激活,然后激活以后让二项解毒蛋白(聚高氧化),紫外线照射产生的自由基是一个定量,如果二项解毒蛋白清除自由基,那么真黑素不用产生了,因为我需要你来保护了,这个时候再去附加一个成分,活性成分2对络氨酸酶会不会产生协同增效的效果呢?以这个创新点写了一个自然基金,非常荣幸得到国家资金委的资助。

 

在课题资助下进行一些研究,首先证明一下这个假设是不是成立,先对紫外线照射黑素细胞进行了一个研究,确定了一个紫外线的剂量。在这个剂量下,培养的黑色素细胞用紫外线照射,照射以后去检测细胞中ROS活性氧生成的量。大家看到左下角这张图可以看到,我们做了30分钟和24小时的实验。

 

30分钟这张图可以明确告诉大家紫外线照射你皮肤内一定会产生大量的自由基,增长是非常明显的,具有显著性差异。24小时以后自由基含量逐渐下降的,为什么下降呢?因为人体有自我保护的能力,我们说的黑色素生成都会起到一定的作用。

 

这两个系统是不是都发生了,左侧的基因和蛋白与抗氧化相关的,中间的和黑色素生成相关的,我们发现确实是紫外线照射以后两边的蛋白都是高表达的,他们都在其中保护细胞免收紫外线的损伤。

 

做完这个以后我们再想一下,是不是让抗氧化系统升高,让黑色素生成系统不去发挥,我们把抗氧化系统高表达了,我们去做紫外线辐射实验,发现黑色素生成明显下降了。

 

通过这个实验,我们首先明确了一个什么现象呢?抗氧化系统和黑色素生成系统是存在一个此消彼涨的关系。其实我也想通过这个图,或者这个实验现象给大家解释一下,实际上我们都说中药是一个多组分、多靶点,作用机制说不清楚又不明白,但是确实有效果,为什么有效果呢?

 

通过我们的研究可以看出来成分很多,你也不知道每一个发挥的作用,实际上不同的成分作用到不同的靶点,最终实现效益最大化,治疗疗效最大化,有这样一个过程。

 

我们提出一个科学假说,我们要进行一个落地和具体的产品进行系列的研究,我们进行了一个强抗氧剂,活性成分2和活性成分1筛了一下,实际上这一块的工作量还是比较大的,我们利用了化药合成上常用的软件分子对接的技术,对络氨酸酶抑制剂和强抗氧剂进行了上百种化学成份的筛选,这是我们发的一篇文章内容,左侧是两个蛋白空间构象,一个是络氨酸酶、一个是抗氧化剂的构象,右侧是化合物和酶会结合,给大家举一个例子好理解,就是锁和钥匙的关系。任何一个物质想作用到治疗疾病也好或者产生效应也好,会有一个结合蛋白,钥匙插进去最顺滑的时候把门打开,下面这个表是结合能,结合能最低的是最有可能作用的成分。

 

通过这样的研究会进行一个排序,每个药物和络氨酸酶作用最强,哪个药物和抗氧化剂作用最强,会进行排序和筛选。

 

这个实验是体外的,第一个是抗氧化,就是比较传统的实验DPTH,大家会用这个做活性氧的评价,对于优选出的化合物进行了一个排序,又对络氨酸酶抑制作用进行了测定,大家看到黑色素生成有两个关键,第一个是络氨酸酶到L多巴,然后到多巴分离的过程,我们看到如果以L络氨酸和L多巴的时候每种化合物抑制效果不一样,其实就是这个不一样,我们在整个筛选过程当中用了很长时间,用了两年过程去找到这个规律。

 

找到规律以后,我们分别是以L络氨酸和L多巴作为底物,我们去筛选哪个作用的时候会产生协和。CI是一个评价药物是否具有协同的协同指数,这个指数大于1的时候是没有,只有小于1的时候才会有协同作用。通过实验发现,第一步以L络氨酸为底物没有协同作用,但是以L多巴的时候基本上出现协同作用,有两个零点九几,这实际上没有协同,因为不符合规律,不是优势的配伍。

 

我们又从配伍的效果找到锁定目标成分,进行后面机理和机制的研究。我们对药物进行了配伍的研究,首先我们看一下抑制率,紫色是配伍以后,配伍以后的药物可以抑制络氨酸酶活性达到效果。这个实验做了一下对于黑色素生成的影响,蓝紫色柱状图可以降低黑色素细胞中黑色素生成总量。

 

这张图片实际上展示这并不是我们做的系统临床研究,因为这个时候是我正在做课题中一个过程,大家看到第一张图片,这个人是我的姐姐,她的左脸衰了一下,过了很长时间她给我打电话,说你给我来一点药,我前两天摔了一下,摔出来黄褐斑,差不多一年了没有变化。我当时把这个东西给了她。旁边这张图片,用了45天,正好我去参加大会发言,在路上我印象很深,在南站的时候她给我打电话,她说你把第一张图片发给我,我觉斑没有了,正好45天。这个图片是我自己,今年过年的时候在家做饭烫伤了,烫伤以后是非常深的色素沉着,我自己观察三个月没有变化,非常巧,尚美找我要一点样品,我说做一点,做完以后剩了一点,每天晚上摸摸脸,顺便摸一下手,我发现不行不能再摸了,变化太快了,因为我需要做这个实验,我先不摸了,正好郭总有TV700的仪器,是专门能够照出来皮肤中黑色素含量的仪器,我停了一下,自己使用前和使用15天的变化,变化还是非常明显的。

 

下面这张图是我一个朋友祛痘的问题,长了一些痘痕和痘印使用28天的效果。通过这张图片可以看出来治疗效果还是比较明显的,有的时候有一些老师或者朋友跟我说中药化妆品效果不好,或者不明显,我确实作为一个专门从事中医药行业的人,我非常热爱我的行业,我确实要说,它不好的原因不是中医药不好,而是你用的这个产品不好,为什么?可能是概念的东西,可能是浓度达不到,可能你选择复方有问题,我们把机理机制做到非常深入的研究,它可以产生市场上同类产品不能够实现的效果。

 

因为我们知道一个皮肤代谢周期是28天,因为我们刚才说了,产生的黑色素是要从肌底层一层一层从角质层到死皮脱落的过程,这个过程28天,如果你非说在10天的时候,在5天的时候就要看到效果,对不起可能真得不好,可能一些违禁的成分,比如说铅、汞,加上那个肯定就好了,但是如果这个产品开发是非常理想的话,还是可以起到处于同类产品比较优良的状态。

 

这张图片是我们正在进行的研究,因为还没有做完,只是给大家展示一个图片,这台仪器是瑞士TiVi700,功能非常强大,照到皮肤肌底层黑色素细胞数量,第一张是人体图片,下面这张和以前胶卷是一样的,你看到黑色不是黑色素,白色是黑色素,可以精确计量皮肤中黑色素个数,这台仪器做出来的实验数据可以发在国际文章上,是被认可的。我们这个实验还在继续进行,通过这个实验我也看了一下,使用产品以后可以降低多少呢?可以降低5%到10%以上黑色素生成量,可能基础值有的是270多,有的是290。用完产品以后,可以降低30左右,当我们使用完这个产品有一个正常的速度,然后使你的皮肤代谢发生一个比较大的变化,比如说激活嫩肤系统。

 

给大家做一个科普,讲完以后大家理解一下,你如何来护肤,我上课的时候跟学生说花1000块钱买一个多么贵,或者2000/3000买一套化妆品,如果你没有买一个很好防晒霜那些东西都白费了。 

 

谢谢大家!

 

本次会议由《美妆头条》新媒体全程跟踪报道,如果您因为一些原因无法亲临现场参加此次会议,可长按识别下方二维码观看视频直播和图片直播。

 

 

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